3000轉(zhuǎn)染試劑是用于將外源DNA或RNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)試劑,廣泛應(yīng)用于基因工程、細(xì)胞治療、疫苗研究等領(lǐng)域。轉(zhuǎn)染試劑通過不同機(jī)制促進(jìn)外源物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞,常見類型包括脂質(zhì)體、聚合物和病毒載體。
1、陽離子脂質(zhì)體類(如Lipofectamine)
電荷吸附:陽離子脂質(zhì)體帶正電,通過靜電作用與帶負(fù)電的核酸結(jié)合,形成脂質(zhì)體-核酸復(fù)合物。
膜融合:復(fù)合物通過疏水相互作用嵌入細(xì)胞膜,經(jīng)胞吞或膜融合進(jìn)入細(xì)胞。
核酸釋放:在細(xì)胞內(nèi)特定條件(如pH變化)下,脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)解體,釋放出核酸。
2、高分子聚合物類(如PEI)
電荷中和:帶正電的聚合物(如聚乙烯亞胺,PEI)與核酸結(jié)合,壓縮DNA形成緊密復(fù)合物。
滲透壓作用:復(fù)合物通過細(xì)胞膜的主動運(yùn)輸或被動擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞,隨后在溶酶體中逃逸并釋放核酸。
3、納米顆粒載體類(如金納米粒子、無機(jī)納米材料)
物理吸附:納米顆粒通過表面修飾(如陽離子基團(tuán))負(fù)載核酸。
細(xì)胞攝取:通過細(xì)胞膜內(nèi)吞或膜穿孔進(jìn)入細(xì)胞,部分納米材料可響應(yīng)特定刺激(如pH、光照)釋放核酸。
4、電穿孔法(非試劑類,但常配合使用)
物理穿孔:高壓電脈沖在細(xì)胞膜上形成瞬時孔洞,允許核酸直接進(jìn)入細(xì)胞。
協(xié)同作用:部分轉(zhuǎn)染試劑(如電穿孔緩沖液)可提高電穿孔效率。